"Naalen" er titelpersonen i filmen, en hensynsløs bagmand for sortbørsen, i hvis kølvand uundgåeligt følger en række andre forbrydelser. Hvordan "Naalen" har fået sit mærkelige tilnavn skal ikke direkte røbes her, kun kan det antydes, at det rummer nær tilknytning til den kostbare og sjældne vare, hvormed han beskæftiger sig i sin "forretning", insulinet.
Lorentzen, alias "Naalen"
Gudrun, laboratorieassistent
Larsen, kriminalkommissær
Alex Birk, stud. med.
Oscar, Naalens håndlanger
Stefan, Naalens håndlanger
Værtinden
Helmer, kriminalassistent
Fru Larsen
Danselærerinde
Leder på insulinfabrikken
Lægen