Efter den amerikanske borgerkrig optager den aldrende oberst McNally jagten på forræderen Ketcham, der viser sig at have overtaget magten i byen Rio Lobo. Det lykkes McNally og kumpaner at kidnappe Ketcham, men banditterne får også fat i en af Waynes håndgangne mænd. Nu er konfrontationen uundgåelig.

Col. Cord McNally
Capt. Pierre Cordona
Shasta Delaney
Phillips
Sgt. Tuscarora Phillips
Ketcham
Maria Carmen
Amelita
Dr. Ivor Jones
Rio Lobo Sheriff 'Blue Tom' Hendricks
Blackthorne Sheriff Pat Cronin
Riley